国产精品久久久久一区二区三区_亚洲欧洲精品视频_欧美不卡在线_欧美一级视频在线_毛片在线网站_好男人午夜影院

網(wǎng)站首頁  ◇  技術(shù)支持  ◇  為什么要從化學(xué)發(fā)光轉(zhuǎn)換到熒光檢測
為什么要從化學(xué)發(fā)光轉(zhuǎn)換到熒光檢測
  • 發(fā)布日期:2019-06-21     信息來源:      瀏覽次數(shù):1948
    • Western blot成像方法取決于二抗的標(biāo)記物,常用的方法有基于酶促反應(yīng)的化學(xué)發(fā)光法,基于熒光染料的可見熒光方法和紅外熒光方法,那么我們應(yīng)該如何選擇呢?
      *合適的Western blot實驗方法取決于您期望獲得哪些信息,也就是取決于您的實驗?zāi)康模【幈容^了現(xiàn)有方法的優(yōu)缺點,并分享了自己的心得,希望能夠幫助您選擇到*佳的實驗方法。

      化學(xué)發(fā)光方法
      化學(xué)發(fā)光western blot是相對容易且靈敏度*的檢測方法,靈敏度可以達(dá)到fg級。
      適用于研究:通過電泳可輕松分離的分子量差異顯著的蛋白。

      > 檢測單一蛋白
      > 確定蛋白有無
      > 檢測抗體反應(yīng)
      > 蛋白純度分析
      > 檢測低豐度蛋白
       

      優(yōu)勢劣勢
      靈敏度高半定量
      實驗流程熟悉酶促反應(yīng)
      兼容膠片和數(shù)字成像系統(tǒng)一次只能檢測單一信號
       需要玻璃和重孵育
       膠片沒有過飽和提醒

       
      熒光檢測方法
      熒光染料分為可見熒光染料和紅外熒光染料,從而將熒光western blot檢測分為可見熒光檢測和紅外熒光檢測。目前可見熒光檢測*多三個通道,可以同時檢測三種不同的蛋白,近紅外檢測*多為兩個通道,一定選擇激光光源激發(fā)的哦,更接近近紅外染料的*大發(fā)射波長680nm和800nm,增強二抗信號,提高檢測的靈敏度。
      熒光Western blot使用熒光染料標(biāo)記的二抗進行檢測,膜上的靶標(biāo)蛋白濃度與可見熒光信號強度呈線性關(guān)系,實現(xiàn)真實可靠的定量分析。熒光染料發(fā)射光譜不同,因此在一張印跡膜上可實現(xiàn)多重檢測。在無需剝離和重孵育條件下,進行上樣量質(zhì)控,可以分析翻譯后修飾蛋白。
      因此當(dāng)您進行如下實驗室,選擇熒光檢測方法,妥妥的:

      > 同時檢測多種蛋白
      > 研究翻譯后修飾蛋白
      > 同一印跡膜的上樣質(zhì)控
      > **定量western blot實驗
       

      優(yōu)勢劣勢
      可進行多重檢測膜會有自發(fā)熒光
      定量 
      信號持久穩(wěn)定 
      實驗方法不需改變太多 

       
      期刊雜志要求:
      例如nature中“Image Integrity and Standards”中鼓勵在一張印跡膜上進行內(nèi)參和目的蛋白的的檢測,同時使用合理的標(biāo)準(zhǔn)化方法:例如:全蛋白歸一化。


       
      化學(xué)發(fā)光屬于酶促反應(yīng),動態(tài)范圍窄,只能實現(xiàn)定性分析,一次只能檢測一個信號,如要檢測多個信號,需要剝離和重孵育,如使用膠片成像,還需要反復(fù)摸索曝光時間,顯影定影設(shè)備和設(shè)備的維護,熒光檢測可同時滿足期刊雜志發(fā)表要求、一次可進行多個信號檢測,反應(yīng)條件一致,jingzhun定量,特別近紅外熒光檢測方法,具有低背景,高信噪比,是現(xiàn)在western blot熒光定量的金標(biāo)準(zhǔn)。

    主站蜘蛛池模板: 亚州 色毛片免费观看 | 亚洲成人精品在线 | 久久草在线 | 天天躁日日躁狠狠躁av麻豆 | 国产精品a久久久久 | 午夜小视频在线观看 | 无线日本视频精品 | 久久久久国产一区二区三区四区 | 欧美另类性视频 | 九九热国产在线 | 亚色中文| 欧美成人免费全网站大片 | 美日韩精品 | 精品午夜寂寞影院在线观看 | 91精品视频免费在线观看 | 国产区精品在线 | 国产精品999 | 国产精品婷婷午夜在线观看 | 精品视频导航 | 亚洲成av人在线视 | 日产国产精品久久久久久 | 国产精品免费一区二区三区 | 天天操网 | 49pao强力免费打造在线高清 | 久草app下载 | 欧日韩不卡在线视频 | 三级网站在线播放 | 你下面好大好硬好想要 | 草草影院地址ccyycom浮力影院37 日日干干夜夜 | 日韩三区 | 奇米网狠狠 | 欧美a级成人淫片免费看 | 成人午夜性a一级毛片美女 91精选 | 成人免费在线电影 | 天天看片中文字幕 | 国产免费av大片 | 老司机午夜免费精品视频 | 国产午夜精品理论片影院 | 国产大片线上免费看 | 午夜激情小视频 | 国产三级做爰在线观看视频 |