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想了解基因擴增儀的工作原理看此文就行
  • 發布日期:2021-12-07     信息來源:      瀏覽次數:1764
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        基因擴增儀性能能滿足不同工作環境的多種需求。可用作以聚合酶鏈式反應為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。基因擴增儀廣泛應用于分子生物學、醫學、食品工業、司法科學、生物技術、環境科學、微生物學、臨床診斷、流行病學、遺傳學、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領域。
       

       

        基因擴增儀的工作原理:
       
        1、基因擴增的基本要素
       
        基因擴增的基本要素與DNA復制的基本要素是一致的。
       
        ①DNA模板:待拷貝的DNA稱為模板,它可以是雙鏈DNA也可是單鏈DNA,Z后擴增得到的產物是雙鏈狀態的。
       
        ②引物:是DNA復制的先鋒,就象結晶過程中的晶核,引導DNA的合成。在PCR擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
       
        ③DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA復制的動力,在dNTP等底物存在時在引物的引導下沿著模板DNA合成互補的DNA鏈。
       
        ④緩沖液:提供DNA合成反應所需的pH,離子強度等環境。
       
        ⑤4種單核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
       
        2、基因擴增儀原理
       
        基因擴增儀是利用PCR技術對特定基因做體外的大量合成,用于以檢測DNA/RNA為目的的各種基因分析。
       
        PCR反應一般設置20~40次循環,每一循環包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三步反應。每一循環的產物作為下一個循環的模板。PCR的擴增效率很高,如果循環次數是30次,那么新生DNA片段理論上達到230拷貝(約為109個分子)。PCR反應每個循環的三個基本反應步驟如下:
       
        ①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA產物解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;
       
        ②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;
       
        ③引物的延伸:溫度升到7。

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